微生物实验室是生物学领域必备实验室。如何配置才能成就一个完备的微生物实验室,哪些仪器必不可少,哪些仪器可有可无?
(1)超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。
(2)培养箱
培养箱有多种类型,它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。 培养箱有多种类型,包括生化培养箱,霉菌培养箱,厌氧培养箱等。具体来说区别如下: a. 生化培养箱只能控制温度。可作为一般细菌的平板培养。 b. 霉菌培养箱可以控制温度和湿度。可作为霉菌的培养。 c. CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养,例如双歧杆菌。
(3)天平
天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别。
(4)微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理,不需洗刷器皿等特点,是微生物实验中使用较为方便的仪器。
(5)菌落计数器
菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。
(6)微波炉/电炉
用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化。
(7)高压灭菌锅
(7)高压灭菌锅
微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。
(8)移液器
液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。
(9)冰箱
冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。具体来说,不同温度下保存的物品如下: a. 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 b. -20℃适用于某些试剂、药品、配好的抗生素等。 c. -80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、感受态等的保存。
(10)生物安全柜
微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的,对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。
(11)摇床
(11)摇床
摇床是实验室常用的一种仪器,在微生物实验操作过程中,液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。
(12)纯水装置
纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别,实验中配制试剂,配制培养基均需用纯水。
(13)生物显微镜
由于微生物体积较小,所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。
(14)冷冻干燥机
(14)冷冻干燥机
主要适用于细菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脱水的产品,在加水以后能够再次恢复原材料的特性,不影响其生物活性等。通过冷冻干燥,细菌之类的材料成为干燥状态,从而不会发生化学改变。
(15)分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度,可以正确选取合适的培养时间。一般是在600nm波长测定菌液浓度。
(16)恒温干燥箱
恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择。例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干,一般玻璃用具的烘干可以选择60℃。
(17)恒温水浴锅
水浴锅是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度,42度,56度下水浴进行,所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。
(18)酸度计
用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。
(19)离心机
用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境,要视样品的种类而定。
(20)液氮罐
液氮罐储存液氮,可用于细菌、酵母、霉菌和大型真菌等各种微生物的长期保存。以上介绍的是微生物实验室的基本仪器配置,在组建实验室时还需要其他一些耗材,例如酒精灯,试管架,三角瓶,量筒,玻璃试管,灭菌吸管,凉干架,剪刀,镊子,脱脂棉,纱布,试管筐,无菌采样及称样袋,接种环,过滤器等。实验人员可以根据自己的需求为微生物实验室配置合适的仪器和耗材。
微生物实验室管理制度
一、实验室管理制度
1.实验室应制定仪器配备管理、使用制度,药品管理、使用制度,玻璃器皿管理、使用制度,并根据安全制度和环境条件的要求,本室工作人员应严格掌握,认真执行。
2.进入实验室必须穿工作服,进入无菌室换无菌衣、帽、鞋,戴好口罩,非实验室人员不得进入实验室,严格执行安全操作规程。
3.实验室内物品摆放整齐,试剂定期检查并有明晰标签,仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。
4.各种器材应建立请领消耗记录,贵重仪器有使用记录,破损遗失应填写报告;药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让,更不得私自拿出。
5.禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗,实验室内不得带入私人物品,离开实验室前认真检查水电,对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6.负责人严格执行本制度,出现问题立即报告,造成病原扩散等责任事故者,应视情节直至追究法律责任。
二、仪器配备、管理使用制度
二、仪器配备、管理使用制度
1.食品微生物实验室应具备下列仪器:培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱,电位 pH计、高速离心机。
2.实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求,保证准确可靠,凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。
3.实验室仪器安放合理,贵重仪器有专人保管,建立仪器档案,并备有操作方法,保养、维修、说明书及使用登记本,做到经常维护、保养和检查,精密仪器不得随意移动,若有损坏需要修理时,不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员,由经理同意填报修理申请、送仪器维修部门。
4.各种仪器(冰箱、温箱除外),使用完毕后要立即切断电源,旋钮复原归位,待仔细检查后,方可离去。
5.一切仪器设备未经设备管理人员同意,不得外借,使用后按登记本的内容进行登记。
6.仪器设备应保持清洁,一般应有仪器套罩。
7.使用仪器时,应严格按操作规程进行,对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏,要追究当事者责任。
三、药品管理、使用制度
1.依据本室检测任务,制定各种药品试剂采购计划,写清品名、单位、数量、纯度、包装规格,出厂日期等,领回后建立账目,专人管理,每半年做出消耗表,并清点剩余药品。
2.药品试剂陈列整齐,放置有序、避光、防潮、通风干燥,瓶签完整,剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。
3.领用药品试剂,需填写请领单、由使用人和室负责人签字,任何人无权私自出借或馈送药品试剂,本单位科、室间或外单位互借时需经科室负责人签字。
4.称取药品试剂应按操作规范进行,用后盖好,必要时可封口或黑纸包裹,不使用过期或变质药品。
四、玻璃器皿管理、使用制度
1.根据测试项目的要求,申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求,硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。
2.大型器皿建立账目,每年清查一次,一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登记清单。
3.玻璃器皿使用前应除去污垢,并用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h后,用清水冲洗干净备用。
4.器皿使用后随时清洗,染菌后应严格高压灭菌,不得乱弃乱扔。
五、安全制度
五、安全制度
1.进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。
2.在进行高压、干燥、消毒等工作时,工作人员不得擅自离现场,认真观察温度、时间,蒸馏易挥发、易燃液体时,不准直接加热,应置水浴锅上进行,试验过程中如产生毒气时应在避毒柜内操作。
3.严禁用口直接吸取药品和菌液,按无菌操作进行,如发生菌液、病原体溅出容器外时,应立即用有效消毒剂进行彻底消毒,安全处理后方可离开现场。
4.工作完毕,两手用清水肥皂洗净,必要时可用新洁尔灭、过氧乙酸泡手,然后用水冲洗,工作服应经常清洗,保持整洁,必要时高压消毒。
5.实验完毕,即时清理现场和实验用具,对染菌带毒物品,进行消毒灭菌处理。6.每日下班,尤其节假日前后认真检查水、电和正在使用的仪器设备,关好门窗,方可离去。
六、环境条件要求
1.实验室内要经常保持清洁卫生,每天上下班应进行清扫整理,桌柜等表面应每天用消毒液擦拭,保持无尘,杜绝污染。2.实验室应井然有序,不得存放实验室外及个人物品、仪器等,实验室用品要摆放合理,并有固定位置。
3.随时保持实验室卫生,不得乱扔纸屑等杂物,测试用过的废弃物要倒在固定的箱筒内,并及时处理。
4.实验室应具有优良的采光条件和照明设备。
5.实验室工作台面应保持水平和无渗漏,墙壁和地面应当光滑和容易清洗。
6.实验室布局要合理,一般实验室应有准备间和无菌室,无菌室应有良好的通风条件,如安装空调设备及过滤设备,无菌室内空气测试应基本达到无菌。
7.严禁利用实验室作会议室及其他文娱活动和学习场所。
微生物实验操作中注意事项
1.由被检验标本或培养物中取材观察细菌形态时,必须使用接种环。接种环系采用一段长约5 ~8cm 硬度适中的镍质电阻丝或特制铂丝,安置在一金属或玻璃棒上制成。无环者则称接种针。
2.接种环或接种针每次使用前后,均须火焰灭菌。即在乙醇灯火焰上彻底烧灼1 次,金属棒或玻璃棒部分亦须转动着通过火焰3 次,用后烧灼时,先将近环处镍丝置于火焰中,使热导向接种环,如直接将环烧灼,则环上残余菌液可因突然受高热而爆烈四溅,有传染危险。待环上菌液蒸发干涸后,再将接种环以垂直方向于火焰中烧灼灭菌,后再将金属棒或玻璃棒部分往复通过火焰。接种针用后灭菌时与接种环同。
3.接种环(针)经火焰后,需待冷却后再沾取标本或放置于工作台上,以防烫死微生物和烧损桌面。
4.由培养基或试管培养物中沾取标本时,培养瓶口、试管口在打开后及关闭前,应于火焰上通过1 ~2 次,以杀死可能从空气中落入的杂菌和由培养物而来的致病菌。打开瓶塞或试管塞时,应将棉塞上端夹于手指间适当的位置,不得将棉塞任意放置别处。
5.不染色标本和染色标本观察后,应立即投入消毒液内灭菌。
6.使用过玻片,务须彻底消除玻片上的染色细菌后再用,否则再次使用时可能做出错误诊断。
举例:一般药厂的微生物实验室如何配置?
1.环境按药典要求限度实验室,室内环境应为万级局部为百级。那么得需要建立一个万级的洁净区,这是必须的,那么局部百级的话,可以通过百级层流台来实现。
2 进行限度实验和阳性对照实验的话,用到菌种,进行菌种保藏的相关设施。如冰箱,玻璃管,接种环,试管架等需齐备。
3 就是稀释时,需要移液枪,配上各种规格的吸量管等。
4 限度实验一般是要做革兰氏染色的,准备一台显微镜(光学镜即可)及相关设备。
5 既然涉及到菌种了,那么灭菌就是必须得了。如果用量小的话,那么一个小的灭菌锅就够了,如果做得多的话,好还是买自动化的大容量灭菌柜。另外,平板等玻璃仪器灭菌用的烘箱一台。储存培养基的恒温恒湿箱一台,用于培养细菌霉菌的恒温培养箱各一台,有条件再多买一台阳性对照的专用培养箱。
6 各类培养基和革兰氏染色的药品。
7 平板、锥形瓶等玻璃仪器,酒精灯,平板、吸量管用的灭菌桶。
8 如果要做液体类样品的限度的话,还需过滤器,及真空抽滤系统一套(储水罐、真空泵)。
9 如果用到一些须先溶解再灭菌的培养基的话,还得准备一台电磁炉。
10 还有一些取样用的相关器具,根据实际情况添加。